Expression, purification of recombinant human cryptochrome I and its application in preparation of protective agent for radiotherapy
기관명 | NDSL |
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저널명 | 生物工程學報 = Chinese journal of biotechnology |
ISSN | 1000-3061, |
ISBN |
저자(한글) | YAO, Chen,SHENG, Chun-jie,LIU, Dong,GAO, Shi-juan,JIANG, Wei,YU, Hong-yan,LI, Jian-dong,CHEN, Hui-ming,WU, Jiao-xiang,PAN, Chang-chuan,CHEN, Shuai,HUANG, Wen-lin |
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저자(영문) | |
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소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2015-01-01 |
초록 | 방사선 치료는 종양 치료에서 가장 흔히 사용되는 수단 중 하나이다. 종양 조직 주변의 정상 세포를 보호하는 방사선 치료 보호제를 구하기 위해, 원핵 발현 플라스미드를 구축하고 대장간균 BL21(DE3)의 유도를 이용하여 인간 크립토크롬 단백질Ⅰ(hCRV1)을 구축하는데 성공했다. 봉입체 용해(inclusion bodies), 경사도의 투석 재생, 니켈 칼럼의 친화성 정제 및 초여과 농축(Ultrafiltration concentration) 등 단백질 정제 공정을 사용하여 1L 균액으로 고순도(95%)의 hCRY1을 10~15 mg 얻을 수 있다. HaCaT 세포에서 세포 DNA 손상 복구 중 생성된 H2A.X foci 형광 강도를 정량 측정하여 hCRY1의 방사선 손상 보호 기능을 감정하였다; hCRY1 및 대조 단백질 처리 후의 세포 사멸 상황을 검측하여 hCRY1의 부작용이 H2A.X foci의 형광 강도에 미치는 영향을 제거하였다. 이는 hCRY1의 심층 연구에 편리한 조건을 제공하는 한편, hCRY1을 새로운 방사선 치료 보호제로 개발할 수 있는 연구에 이론적 기초를 제공하였다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART72513938 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | biological rhythm,inclusion bodies,gradient dialysis,Ni-NTA,DNA damage,HaCaT,H2A.X foci,immunofluorescence,생물 주기,봉입체,경사도 투석,Ni-NTA,DNA 손상,HaCaT,H2A.X foci,면역 형광 |