저자(한글) |
WANG, Dong-bo,MA, Yi,WANG, Xiao-li,ZHAO, Shao-jun,HAN, Lei,HONG, An |
초록 |
본 논문에서는 유전자 공학 기술을 이용하여 각막 상피세포(Corneal epithelial cells)의 증식을 촉진할 수 있는 뇌하수체 아데닐산고리화효소 활성화 폴리펩티드 27(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide, PACAP 27) 유도물 폴리펩티드 RP2의 고효율 제조 과정을 구현한다. 그리고 세포 수준에서 그의 생물학 작용을 초보적으로 연구하여 각막 손상의 복구 치료에 실험적 기초를 제공한다 유전자 재조합기술을 사용하여 재조합 펩티드 RP2를 발현한다. Chitin-Beads와 HPLC 정제, SDS-PAGE와 질량분석법으로 감정한 후 그가 생쥐의 각막 상피세포 증식에 미치는 영향을 연구한다. 실험 결과: 유전자재조합 기술을 이용하여 제조한 PACAP 27 유도의 폴리펩티드 RP2 분자량이 3.3 kDa이고 순도가 96%이다; 재조합 펩티드 RP2, PACAP 27 및 PBS를 각각 이용하여 생쥐의 각막 상피세포를 처리한다. 24시간과 48시간 지났을 때 RP2 처리 그룹의 각막 상피세포 증식률이 각각 (49.6±3.1)%, (93.0±1.7)%이고 PACAP 27 처리 그룹의 증식률이 각각 (29.0±2.4)%, 78.8±2.6)%이며, PBS 대조그룹의 세포 증식률이 각각 (20.2±1.1)%, (40.9±3.3)%이다. 본 논문에서 구축한 재조합 폴리펩티드의 제조 기술 조건을 이용하여 PACAP 유도의 폴리펩티드 RP2에 대한 고효율 제조를 구현할 수 있다. RP2는 각막 상피세포의 증식을 효과적으로 촉진할 수 있으므로 각막 손상의 복구 치료 과정에서 새로운 후보 약물이 될 가능성이 있다. |